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颁 证 日：
优 先 权：
申请(专利权)人：
杭州华大基因研发中心
地 址：
310007浙江省杭州市西湖区西山路19号
发 明 (设计)人：
阎东升;董伟;谈学海;胡咏武
国 际 申 请：
国 际 公 布：
进入国家日期：
专利 代理 机构：
杭州求是专利事务所有限公司
代 理 人：
张法高
摘要
本发明公开了一种细胞测试体系及构建方法和用途。细胞测试体系是CHO-K1/d2EGFP和HEK-293/d2EGFP细胞系，并且其中包含由4xCRE和HSV-TK的DNA序列所构建的4xCRE-d2EGFP质粒。细胞测试体系构建方法是设计4xCRE-HSV-TK序列，人工合成相应的寡核苷酸；以该寡核苷酸为模板，设计引物进行PCR扩增并克隆到d2EGFP载体上；测序鉴定连接产物，挑选出正确的重组质粒，将质粒转入CHO-K1和HEK-293细胞中；用G418抗生素筛选抗性克隆并进行功能测试。细胞测试体系的用途是用于筛选与cAMP信号传导途径相互作用的化合物。本发明的优点是：灵敏度高，特异性强，检测方便，经济，易于观察，可应用于大规模药物筛选，缩短药物研发周期，减少研发费用。
主权项
权利要求书
1.一种细胞测试体系，其特征在于它是CHO-K1/d2EGFP和HEK-293/d2EGFP
细胞系，并且其中包含由4xCRE和HSV-TK的DNA序列所构建的4xCRE-d2EGFP
质粒。
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