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国家日期：
专利 代理 机构： 广州知友专利代理有限公司
代 理 人： 宣国华
摘要
本发明公开了一种人神经干细胞的培养方法，包括以下步骤：1、配制由DMEM和F12以1∶1混合而成的基础培养液、胰岛素、盐酸丁二胺、硒化钠、氢化可的松、L－谷氨酰胺、人转铁蛋白和黄体酮组成的人神经干细胞培养基；2、即时采集病员本人自体血清；3、将采集的病员本人自体血清加入配制出的人神经干细胞培养基中，在35℃～38℃、加3～7％的CO2温箱孵育。本发明方法简单，可重复性强，操作简便易行；为有关神经干细胞及其应用的科研、教学、临床应用等能起到不可估量的作用，同时也孕育着巨大的社会效益和经济效益。
主权项
权利要求书 1、一种人神经干细胞的培养方法，其特征在于包括以下步骤： (1)配制人神经干细胞培养基，该培养基的配制步骤为：a、取DMEM和F12按 1∶1混合而成的基础培养液，加纯净水至浓度为10～25g/L，并充分搅拌溶解，制得细胞的一般基础培养液；b、再取胰岛素(I ulin)、L-谷氨酰胺(L-Glutamine)、盐酸丁二胺(Putrescine)、硒化钠(Sodium Selenide)、人转铁蛋白(Tra ferrin)、氢化可的松(Hydrocortisone)、黄体酮(Progesterone)依次加入基础培养液中，充分搅拌均匀；c、以1～10当量浓度的氢氧化钠调pH为7.4～8.0；d、层流细胞培养室抽滤消毒，4℃储存备用。 (2)即时采集病员本人自体血清，采集步骤为：a、准备玻璃离心管、一次性无菌注射器、酒精棉；b、常规消毒、前臂静脉取血，不加任何抗凝剂；c、将静脉血置于无菌玻璃离心管中，室温或4℃条件下，离心1500～1800rmp，10分钟，可得到病员自体血清，收集血清； (3)取步骤1配制出的人神经干细胞培养基，取步骤2即时采集病员本人自体血清加入培养基中，血清的含量为培养基的5～20％；将加入血清的培养基置于培养箱，在35℃～38℃、加3～7％的CO2温箱孵育11～21天。
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