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| 所属分类： |
生物技术 |
项目来源： |
自创 |
| 技术持有方姓名： |
HKUST RandD Corp Ltd |
所在地域： |
港澳台 |
| 是否中介： |
否 |
是否重点项目： |
否 |
技术简介：
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这是一种测定活细胞中的早期程式化细胞死亡的新方法，这个方法主要利用一个由改性的绿色荧光蛋白质分子和分子间插入的感测器序列组成的分子探测器。程式化细胞死亡过程是一个与许多疾病密切相关的重要细胞过程。程式化细胞死亡过程中的关键步骤是启动如caspase-3等一系列细胞内蛋白酶。这些capase-3的基质通常分有一致识别和分裂氨基酸序列。例如，capase-3的识别序列是Asp-Val-Asp。利用基因工程技术，我们可以设计一个分子探测器，将对识别序列进行编码的基因插入指标基因（如绿色荧光蛋白质），从而检验caspase的活性。当进行编码的基因在细胞内起作用时，其基因产物（如蛋白质）便成为特定capsase的基质，一经被启动，便可被capsage分裂。通过改变感测器序列，我们可以设计出类似的分子探测器来探测不同蛋白酶的活性。绿色荧光蛋白质是一种在水母Aequorea victoria内发现的天然荧光蛋白质。当非水母细胞内有克隆的绿色荧光蛋白质基因时，这个基因可生成内生荧光蛋白质，而不需要额外的转化酶或基质。近三年来，绿色荧光蛋白质在许多基质细胞内一直被应用来指示基因。在设计这个分子探测器时，我们将caspase识别序列置于绿色荧光蛋白质分子之间，这样（1）这个识别序列置于分子间不会破坏绿色荧光蛋白质的荧光属性，（2）基质序列可以轻易进入蛋白酶。当含有这类改性绿色荧光蛋白质基因的质体脱氧核糖核酸进入基质细胞并起作用，使用荧光显微镜或荧光启动的细胞分类装置时，其荧光信号可以探测这一经过改良的绿色荧光蛋白质基因。当程式化细胞死亡过程中capsase一旦被启动，它会把经过改良的绿色荧光蛋白质分子在基质插入点中分裂，而且会大大改变分子的荧光属性。荧光性的这一变化可通过光学方法来测定，因而可用来检验细胞是否处于程式化细胞死亡过程中。由于程式化细胞死亡在许多重要疾病中如多种癌症、爱滋病和自身免疫疾病等等起着关键作用，那些能够促进机能不良细胞内程式化细胞残废的药物能够用于控制这些疾病。因此，这项发明对于制药产业迅速筛选药物具有很高的使用价值。
这项发明可迅速测定由任何物质所诱发的早期程式化细胞死亡。这个方法可广泛应用于科研机构和制药产业所进行的科研中。测定程式非常简便。由于这项发明是基因产品，含有编码基因的细胞会自动产生探测器，所以不需要利用特别程式将探测器注入细胞内。而且，这发明可以测定各个活细胞内程式化细胞死亡过程。这个方法对于大规模筛选促进或阻碍程式化细胞死亡的药物非常有用。
就短期来说，这项发明可被世界上许多的实验室用来进行生物医学研究。在将来，制药公司可利用这发明迅速筛选药物及进行毒性测试。
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