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分 类 号：
C12N9/48;C12N9/52;C12N1/20;C12N1/00;C07K14/00;C07H21/04
颁 证 日：
优 先 权：
申请(专利权)人：
印度生物技术国际有限公司;科学及工业研究委员会
地 址：
印度海得拉巴
发 明 (设计)人：
G·S·哈特里;R·沙马
国 际 申 请：
CT/IB99/01704 1999.10.19
国 际 公 布：
WO01/29201 英 2001.4.26
进入国家日期：
2002.06.19
专利 代理 机构：
中国专利代理(香港)有限公司
代 理 人：
张广育;孟凡宏
摘要
克隆了模仿葡萄球菌(staphylococcus simula )溶葡萄球菌素基因的一部分并且在前溶葡萄球菌素原和溶葡萄球菌素原不存在的条件下在大肠杆菌胞浆中过度表达，从而产生成熟溶葡萄球菌素，其表达在IPTG诱导型启动子和核糖体结合位点的转录控制下。被转化宿主细胞的IPTG诱导在完全缺失前溶葡萄球菌素原和溶葡萄球菌素原的条件下产生细胞内的可溶成熟溶葡萄球菌素(27KDa)。如此形成的成熟溶葡萄球菌素不需要翻译后修饰。如此形成的成熟溶葡萄球菌素可以用于治疗和预防葡萄球菌感染。
主权项
权利要求书
1.一种生产不含前溶葡萄球菌素原和溶葡萄球菌素原的成熟溶葡
萄球菌素内肽酶的方法，其特征在于：
(a)提供一种遗传构建体，该构建体含有一段在编码溶葡萄球菌
素原的元件不存在的条件下编码成熟溶葡萄球菌素内肽酶的核苷酸序
列，和一个操作性连接在编码成熟溶葡萄球菌素内肽酶的核苷酸序列
上的启动子；
(b)转化宿主细胞使其含有和表达步骤(a)的遗传构建体，这
样不含前溶葡萄球菌素原和溶葡萄球菌素原的成熟溶葡萄球菌素在宿
主胞浆中积累；以及
(c)从宿主细胞中分离出成熟溶葡萄球菌素。
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