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白溶于水的特性,用水提法浸取,并用乙醇分级沉淀的方法分离,最后用阴离子交换柱,和凝胶排阻层析纯化多糖。本发明方法以一般藻类为原料,提取、纯化各种藻类的胞内、外多糖,并且可实现藻蛋白和藻多糖的共同提取,保持蛋白和蛋白多糖的生物活性。最大限度的增加原料的利用率,降低生产成本。本发明方法适合于大规模生产,且能普遍应用于各种藻类多糖的分离纯化。
主权项
权利要求书
1.藻类多糖的提取分离方法,其特征是包括以下步骤:
1)取新鲜藻或藻粉加蒸馏水或磷酸缓冲溶液混合,进行超声破碎;
2)将上述破碎液离心、弃沉淀,取上清;
3)将上清脱去蛋白;
4)在脱去蛋白的溶液中加入2~3倍于该溶液体积的乙醇进行沉淀,离心收
集沉淀,丙酮洗涤,干燥,得粗多糖;
5)取粗多糖溶于蒸馏水或Tris-HCl缓冲液,制成饱和溶液,离心弃沉淀,
将上清上样于DEAE-Sepharose Fast Flow柱,以Tris-HCl为洗脱液,进行NaCl
梯度洗脱,苯酚—硫酸法跟踪检测,收集单一峰,透析去离子后上样于sephadex
G-100或sephadex G-75柱,以去离子水进行洗脱,收集单一峰,冷冻干燥得纯
化的单一藻多糖。
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