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其中包含由4xCRE和HSV-TK的DNA序列所构建的4xCRE-d2EGFP质粒。细胞测试体系构建方法是设计4xCRE-HSV-TK序列,人工合成相应的寡核苷酸;以该寡核苷酸为模板,设计引物进行PCR扩增并克隆到d2EGFP载体上;测序鉴定连接产物,挑选出正确的重组质粒,将质粒转入CHO-K1和HEK-293细胞中;用G418抗生素筛选抗性克隆并进行功能测试。细胞测试体系的用途是用于筛选与cAMP信号传导途径相互作用的化合物。本发明的优点是:灵敏度高,特异性强,检测方便,经济,易于观察,可应用于大规模药物筛选,缩短药物研发周期,减少研发费用。
主权项
权利要求书
1.一种细胞测试体系,其特征在于它是CHO-K1/d2EGFP和HEK-293/d2EGFP
细胞系,并且其中包含由4xCRE和HSV-TK的DNA序列所构建的4xCRE-d2EGFP
质粒。
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