|
|
|
|
|
|
|
|
分 类 号：
C12Q1/04
颁 证 日：
优 先 权：
申请(专利权)人：
中国人民*军事医学科学院生物工程研究所
地 址：
100071北京市丰台区东大街20号国家生物医学分析中心
发 明 (设计)人：
段海清;张兆山
国 际 申 请：
国 际 公 布：
进入国家日期：
专利 代理 机构：
北京纪凯知识产权代理有限公司
代 理 人：
关畅
摘要
本发明的名称为低成瘾性镇痛药物高通量筛选平台，涉及生物学筛选模型。本发明一种低成瘾性镇痛药物的高通量筛选方法，基本上包括以下步骤：1)将规模培养的CHO-OPR8及CHO-P分别装入层析柱中，得到CHO-OPR8层析柱及CHO-P层析柱；2)将待选择的肽库上样到CHO-OPR8层析柱，洗涤层析柱，将收集的洗脱液上样到CHO-P层析柱，收集穿过峰，得到第一轮筛选出的候选多肽；3)第二轮洗涤4)第三轮洗涤5)将最后一轮筛选的噬菌体全部转染K91Kan，挑选阳性菌株进行接种培养，提取质粒，进行序列分析；6)将复制型噬菌体质粒的序列分析结果与空载体进行比较，寻找插入片段的核苷酸序列，推导出氨基酸序列，得到目的多肽。
主权项
权利要求书
1、一种低成瘾性镇痛药物的高通量筛选方法，基本上包括以下步骤：
1)将规模培养的CHO衍生工程细胞株CHO-OPR8 CGMCC №0613及CHO衍生
工程细胞株CHO-P CGMCC №0612分别装入层析柱中，得到CHO-OPR8层析柱及
CHO-P层析柱；
2)将待选择的肽库上样到CHO-OPR8层析柱，洗涤层析柱后采用洗脱液洗脱与
CHO-OPR8特异结合的样品，将收集的洗脱液上样到CHO-P层析柱，收集穿过峰，
得到第一轮筛选出的候选多肽；
3)将第一轮筛选出的候选多肽再上样到CHO-OPR8层析柱，将收集的洗脱液上
样到CHO-P层析柱，收集穿过峰，得到第二轮筛选出的候选多肽；
4)将第二轮筛选出的候选多肽再上样到CHO-OPR8层析柱，将收集的洗脱液上
样到CHO-P层析柱，收集穿过峰，得到第三轮筛选出的候选多肽；
5)将最后一轮筛选的噬菌体全部转染K91Kan，挑选阳性菌株进行接种培养，
提取质粒，进行序列分析；
6)将复制型噬菌体质粒的序列分析结果与空载体进行比较，寻找插入片段的核
苷酸序列，推导出氨基酸序列，得到目的多肽。
|
|
|
|
|
设为首页 | 加入收藏 | 广告服务 | 友情链接 | 版权申明
Copyriht 2007 - 2008 © 科普之友 All right reserved |
