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    一种固体发酵批量培养枯草芽孢杆菌变异菌株的方法<%=id%>

    12R1∶125)
    颁 证 日:
    优 先 权:
    申请(专利权)人: 华东师范大学;昆山科新环境生物工程有限公司
    地 址: 200062上海市中山北路3663号
    发 明 (设计)人: 吴自荣;郭大磊;黄静
    国 际 申 请:
    国 际 公 布:
    进入国家日期:
    专利 代理 机构: 上海德昭专利事务所
    代 理 人: 程宗德
    摘要
      一种固体发酵批量培养枯草芽孢杆菌变异菌株的方法,属生物材料培养技术领域,操作包括配制固体培养基、灭菌、接种培养,收获活菌四个步骤,有收集湿菌体不需专门的离心机,即设备投资低、收获的活菌数多和无废液排放和环境污染问题的优点,适于用来批量培养枯草芽孢杆菌变异菌株的湿菌体,为工业化生产复合型活菌生物净水剂提供活菌原料,是一项能促进水产养殖的新技术。
    主权项
      权利要求书 1.一种固体发酵批量培养枯草芽孢杆菌变异菌株的方法,其特 征在于,操作步骤: 第1步 配制固体培养基,按该培养基的重量百分比配方,黄 豆并粉2~60%、玉米并粉2~60%、米糠2~40%、麸皮2~40%、硫酸 铵0.4%和氯化铵0.2%,称取固体原料,将硫酸铵和氯化铵溶于重量 为固体原料总重量的30~40%的水中,再与其余固体原料混和,搅 拌均匀,均分为四份,分别投入四个固体发酵罐,制成相同的固体 培养基四罐; 第2步 灭菌,在压力、温度和发酵罐转速分别为 1.05~1.3kg/cm2、121~125℃和6~60rph,即转/小时的条件下,对四 罐固体培养基进行高压灭菌处理,处理时间为30~60分钟; 第3步 接种培养,罐温降至40~50℃时,在发酵罐旋转的情 况下,向每罐喷入重量为每罐中固体原料重量的30~40%的无菌水, 当罐温降至30~40℃时,将预先经二级培养成的处于对数生长期的 枯草芽孢杆菌变异菌株1#、2#、3#和4#的细菌种子分别接入上二步 所述的四个发酵罐,每罐的接种量为每罐固体原料重量的2~3%,在 罐压、通风量、发酵罐转速和罐温分别为0.2~0.8kg/cm2、 1600~2000L/h、6~60rph和30~40℃的条件下,对四罐变异菌株连续 发酵培养20~50小时; 第4步 收获活菌,经上步处理,上述变异菌株大量繁殖,从 四个发酵罐分别收获大量枯草芽孢杆菌变异菌株1#、2#、3#和4#的 湿菌体,每种湿菌体的重量大致与投入每罐内固体原料和水的重量 相等,每克湿菌体含活菌数20亿~50亿个。
         

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