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一种固体发酵批量培养枯草芽孢杆菌变异菌株的方法<%=id%> |
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12R1∶125)
颁 证 日:
优 先 权:
申请(专利权)人:
华东师范大学;昆山科新环境生物工程有限公司
地 址:
200062上海市中山北路3663号
发 明 (设计)人:
吴自荣;郭大磊;黄静
国 际 申 请:
国 际 公 布:
进入国家日期:
专利 代理 机构:
上海德昭专利事务所
代 理 人:
程宗德
摘要
一种固体发酵批量培养枯草芽孢杆菌变异菌株的方法,属生物材料培养技术领域,操作包括配制固体培养基、灭菌、接种培养,收获活菌四个步骤,有收集湿菌体不需专门的离心机,即设备投资低、收获的活菌数多和无废液排放和环境污染问题的优点,适于用来批量培养枯草芽孢杆菌变异菌株的湿菌体,为工业化生产复合型活菌生物净水剂提供活菌原料,是一项能促进水产养殖的新技术。
主权项
权利要求书
1.一种固体发酵批量培养枯草芽孢杆菌变异菌株的方法,其特
征在于,操作步骤:
第1步 配制固体培养基,按该培养基的重量百分比配方,黄
豆并粉2~60%、玉米并粉2~60%、米糠2~40%、麸皮2~40%、硫酸
铵0.4%和氯化铵0.2%,称取固体原料,将硫酸铵和氯化铵溶于重量
为固体原料总重量的30~40%的水中,再与其余固体原料混和,搅
拌均匀,均分为四份,分别投入四个固体发酵罐,制成相同的固体
培养基四罐;
第2步 灭菌,在压力、温度和发酵罐转速分别为
1.05~1.3kg/cm2、121~125℃和6~60rph,即转/小时的条件下,对四
罐固体培养基进行高压灭菌处理,处理时间为30~60分钟;
第3步 接种培养,罐温降至40~50℃时,在发酵罐旋转的情
况下,向每罐喷入重量为每罐中固体原料重量的30~40%的无菌水,
当罐温降至30~40℃时,将预先经二级培养成的处于对数生长期的
枯草芽孢杆菌变异菌株1#、2#、3#和4#的细菌种子分别接入上二步
所述的四个发酵罐,每罐的接种量为每罐固体原料重量的2~3%,在
罐压、通风量、发酵罐转速和罐温分别为0.2~0.8kg/cm2、
1600~2000L/h、6~60rph和30~40℃的条件下,对四罐变异菌株连续
发酵培养20~50小时;
第4步 收获活菌,经上步处理,上述变异菌株大量繁殖,从
四个发酵罐分别收获大量枯草芽孢杆菌变异菌株1#、2#、3#和4#的
湿菌体,每种湿菌体的重量大致与投入每罐内固体原料和水的重量
相等,每克湿菌体含活菌数20亿~50亿个。
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