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光、电镜通用的新型融合标签:高尔基器有丝分裂过程(图) |
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生物通报道:能应用于光学显微镜和电子显微镜的联合分子标记效果显著,特别是在分析高尔基器(Golgi apparatus)等动态细胞器时具有独特优势。高尔基器在减数分裂(mitosis)初期进行分裂,经过一系列至今还不清楚的事件以后,重新聚集。高尔基体膜(Golgi membranes)的精确定位,以及减数分裂过程中的固有蛋白仍然不甚明了,部分原因在于分子标记和光学显微镜的分辨率都很有限。最近,来自美国国家研究中心(National Center for Microscopy and Imaging Research)的Guido M. Gaietta等研究人员研制出一种融合标签,对减数分裂过程中高尔基器的变化进行了详细观察,研究结果刊登于11月21日PNAS。研究人员首先设计出一种由荧光蛋白标记的α-mannosidase(甘露糖苷酶) II的前117个氨基酸残基、一种荧光蛋白和半胱氨酸基序组成的融和标签。随着标签暴露于高尔基体内腔,甘露糖苷酶成分可以作为进入高尔基膜的参照物。这种荧光蛋白不需要其他辅助设备,在光学显微镜下可见,但半胱氨酸标记在穿膜过程中经过磷酸化后会明显变弱,加上ReAsH标记,在光学显微镜下操作,激发氨基联苯胺的光电转换(photoconversion < 1 > < 2 >
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