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研究,成功地分离出HPA编码基因全序列。经将该全长基因克隆入真核表达载体,在哺乳动物细胞中表达出有活性的HPA蛋白。同时,检测HPA在哺乳动物细胞中的表达特性时还发现,该酶的mRNA长度为1.6kb,显示细胞完整转录了HPA全长编码基因,可翻译出完整的HPA蛋白。此结果进一步验证了HPA在蛋白水平被加工而成为有活性的酶这一成熟过程。另据李燕杰介绍,经对HPA活性反复检测显示,HPA大部分定位于COS-7和CHO细胞内,没有或仅有少数被分泌到细胞外,其表达和分泌受生理条件的严格调控,以免过度表达引起各种疾病。然而,HPA在肿瘤细胞中,则表达水平增强,且被分泌到细胞外基质中,从而促进肿瘤转移,这就是其成为肿瘤转移关键酶的关键所在。对于这一机理,还有待进一步研究。本研究筛选出稳定表达成熟的HPA的CHO细胞株,将为进一步研究HPA的结构与功能,研发其抗体及抑制剂提供崭新的思路和工具。 你还没注册?或者没有登录?
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