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一种非天然氨基酸的新陈代谢整合过程,使得研究者能够快速地对哺乳动物细胞溶解产物中新合成的蛋白质进行亲合纯化,目的是通过质谱技术进行直接的鉴定。 在一个细胞生命周期中任何特定的时刻,蛋白质的表达情况构成了它的蛋白质组模式,这种情形是根据环境刺激而处于不断的动态变化之中。虽然质谱仪技术已经发展成为一种描述不同细胞状态下蛋白质组模式的最为流行的技术,但如果要确定何种基因会由于外界刺激而处于激活状态却并非易事,原因在于新合成的蛋白质肯定在化学特性方面与它们更为年长的兄弟姐妹是相同的。 为了解决这一问题,Erin Schuman及其在美国加州理工学院的同事一起设计出了这样一种思路,通过运用一种生物正交亲合键将一种非天然氨基酸进行新陈代谢方面的整合,他们试图直接从细胞中将新合成的蛋白质分离开来。通过运用一种补足键试剂来分离新合成的标记蛋白质,这些“子蛋白”能通过质谱技术直接进行鉴定。使用35S半胱氨酸或者35S甲硫氨酸的新陈代谢整合物,在对这种更为传统的放射示踪技术进行改进时,一种亲合键不仅仅能帮助检测新合成的蛋白质,而且能为了明确的鉴定目的而进行分离。 这种名为AHA的非天然氨基酸,是一种 < 1 > < 2 >
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