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两位物理学家Betzig跟Hess,利用一部自己拼凑组装的光学显微镜,发展出一套新的光学显微镜photoactivated localization microscopy (PALM),可以观察细胞中个别蛋白质分子的位置,并使分辨率达到电子显微镜的层级。研究结果发表于Science期刊的网络抢鲜版(Science Express)中。 传统光学显微镜受限于光的波长,无法观察到200 nm以下的物体。虽然电子显微镜可以达到奈米级的分辨率,但通电的结果容易造成样品的破坏,因此能观察的样本也相当有限。这套新式的显微放大系统,将可以突破过去光学显微镜上的限制,更精准的定位观察细胞里的蛋白质。 去年春天,Betzig和Hess耳闻美国国家卫生院Lippincott-Schwartz实验室研发的绿荧光蛋白质,能藉由紫外光激发调控荧光的强度,于是两人用旧器材花费两个月的时间打造出新的显微镜,之后并与Lippincott- Schwartz及佛罗里达州立大学的Davidson展开合作,测试生物样品,在每平方微米(μm2)塞满高达十万个分子的细胞样品中,成功分辨出相距仅2~25 nm的分子。 实验中把欲观测蛋白质接上GFP,利用微弱紫外闪光使部分GFP分子产生光化学转换,再用黄光二度激发产生荧光,每次只看到少数分子的位置、荧光持续数秒钟,如此重复约一万次,以建立整个样本中蛋白质分布的情 < 1 > < 2 >
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