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g2+浓度非常敏感.以活性程度 很低的鲑鱼精子DNA为模板，dNTP的浓度为0.7～0.8mmol/L时，用不同浓度Mg2+进行 PCR反应10min，测定结果为Mgcl2浓度在2.0mmol/L时该酶催化活性最高，此浓度能最 大限度地激活TaqDNA聚合酶的活性，Mg2+过高就抑制酶活性，当Mgcl2浓度在 10mmol/L时可抑制40～50%的酶活性.由于Mg2+能与dNTP结合而影响PCR反应液中游离 的Mg2+浓度，因而Mgcl2的浓度在不同的反应体系中应适当调整，优化浓度.一般反应 中Mg2+浓度至少应比dNTP总浓度高0.5～1.0mmol/L.适当浓度的KCL能使Taq DNA聚合 酶的催化活性提高50～60%，其最适浓度为50mmol/L，高于75mmol/L时明显抑制该酶 的活性.(三)忠实性 TaqDNA聚合酶具有5→3聚合酶活性和5→3外切酶活性，而无3→5外切活 性，它不具有Klenow酶的3→5校对活性.因而，在PCR反应中如发生某些碱基的错 配，该酶是没有校正功能的.Taq DNA聚合酶的碱基错配机率为2.1×10-4.(四)抑制剂 低浓度的尿素、甲酰胺、二甲基甲酰胺(DMF)和二甲基亚砜(DMSD)对Taq DNA聚合酶的 催化活性并无影响.极低浓度的离子表面活性剂如脱氧胆胺酸钠(小于0.06%)，十二烷 基肌氨酸钠(小于0.02%)，十二烷基硫酸钠(SDS，小于0.01%)几乎可完全抑制该酶的 活性.而非离子表面活性剂在较高浓度(Tween20，NP-40.和Tritox-100)如>5%时方能 抑制该酶的活性.变性剂对TaqDNA聚合酶活性的影响变性剂浓度 活性(%)乙醇≤3%100 10%110尿素≤0.5mol/L100 1.0mol/L118 1.5mol/L107 2.0mol/L82DMSO≤1%100 10%53 20%11DMF≤5%100 10%82 20%17甲酰胺≤1%100 15%86 20%39SDS0.001%105 0.01%10 0.1%〈0.1 低浓度的NP-40(0.05%)和Tween20(0.05%)能增强TaqDNA聚合酶的活性.低浓度SDS对 该酶的抑制作用可加入一定浓度的NP-40和Tween20抵消.TaqDNA聚合酶可在-20℃贮 存至少6个月.
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