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    分离纯化总RNA

    1)      用酸性酚-硫氰酸胍-氯仿提取纯化组织和细胞中的RNA1.      选取从组织细胞或细胞中提取RNA的适宜方法组织a.       分离组织并立即置于液氮中。b.      将约100 mg冰冻组织含液氮的研钵中,用研棒研磨。研磨过程中可加入液氮使组织保持冰冻状态。c.       将组织碎末移入含3 ml溶液D的管中。D溶液(变性液)4 mol/L 硫氰酸胍25 mmol/L 柠檬酸钠·2H2O0.5%(m/V)月桂基磺酸钠0.1  mol/L β-巯基乙醇将250 g硫氰酸胍、0.75 mol/L(pH 7.0)柠檬酸钠17.6 ml和26.4 mol 10% (m/V) 月桂基磺酸钠于293 ml水中。加入搅拌子于磁力搅拌器上65℃混匀,直至完全溶解。室温贮存溶液D,每次临用前加入14.4 mol/L的β-巯基乙醇,每50 ml溶液D加0.36 ml。溶液D可在室温下避光保存数月。注意胍基盐在低温下易沉淀。d.      用搅拌
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