确定各种可能与目标蛋白相互作用的蛋白质，“撒大网”l 双杂交和其他双成分系统第一阶段：诱饵-LexA融合蛋白的鉴定诱饵-LexA融合蛋白的构建1．将编码诱饵蛋白的靶DNA克隆到LexA融合载体的多聚接头处，以合成一种框架内的LexA融合基因。确定诱饵序列的羧基端存在翻译终止序列。形成的质粒作为pBait。2．采用下列LexA融合基因和lexAop-lacZ报道质粒的组合，建立一系列EGY48 lexAop-LEU2选择的转化酵母菌：a. pBait + pMW12（活化测定）b. pSH17-4 + pMW12（活化的阳性对照）c. pRFHM1 + pMW12（活化的阴性对照）d. pBait + pJK101（抑制/DNA结合测定）e. pRFHM1 + pJK101（抑制的阳性对照）f.
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