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应用激酶交换反应的末端标记1.在置冰浴中的1.5ml微量离心管内依次加入:50 pmol合成寡核苷酸2.5μl 10×反应缓冲液1.5μl ADP(300μmol/L终浓度)10μl γ-[32P]ATP(33pmol)1.5μl T4多核苷酸激酶(15U)蒸馏水加至25μl2.37℃水浴温育30分钟。3.加入2μl 0.5mol/L EDTA或加热至68℃ 10min终止反应。混合液经Sephadex G-25自旋转,离心(2000×g,4min),去除未掺入的核苷酸。用液闪计数计数1μl柱洗脱液。 你还没注册?或者没有登录?
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