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用T4标记的5’末端1．无菌的1.5ml为了离心管置冰浴上顺序混合下列组分：50 pmol合成的寡核苷酸2.5μl 10×反应缓冲液10μl γ-[32P]ATP（33pmol）1.5μl T4多核苷酸激酶（15U）灭菌双蒸水加至25μl2．37℃温育30min。3．当反应物正温育时，以2000×g离心2min制备Sephadex G-25自旋柱。4．加入2μl 0.5mol/L EDTA或加热至68℃ 10min终止反应。将反应混合物装至自旋柱并于2000×g离心4min。1μl柱洗脱液用液闪计数仪计数。
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