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体外转录法l 体外转录合成单链RNA探针1. 用适当的限制酶消化超螺旋质粒DNA制备5 pmol的线性模板DNA。取一小份消化的DNA（100ng）进行琼脂糖凝胶电泳分析。如有必要，再补加限制性酶进行温育，直至不再残存痕量的未消化DNA。2. 如必须用产生3’突出端的限制酶如Pst I 或 Sst I，则应用噬菌体T4 DNA聚合酶在四种dNTP的存在下处理消化的DN*段，以除去产生的3’突出端。3. 用酚：氯仿抽提及用标准乙醇沉淀纯化模板DNA。将DNA溶解于水，使其终浓度为100 nmol/L（如3kb质粒为200μg/ml）。4. 将下列前六种组分温育至室温，在一个灭菌的0.5 ml微量离心管中，室温下以下列顺序混合：模板DNA &nbs
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