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叶绿体RNA的体外加工与紫外交联分析RNARNA的合成l DNA模板的线性化1.根据供应商的指导用合适的限制酶酶解含有DNA模板(如亚克隆在转录载体如pBluescript®(Stratagene)上的菠菜叶绿体psbA基因)的质粒(Schuster and Gruissem1991)。2.用DNA琼脂凝胶(Sambrook et al. 1989)分析线性化质粒以检查酶解是否完全。3.用乙醇沉淀DNA(Sambrook et al. 1989),并重悬DNA沉淀于水中,调整线性DNA终浓度为200μg/ml。 l DNA模板的转录1.向微量离心管加入下列反应液DNA模板 2μl(0.4μg)反应缓冲液(5×) &n < 1 > < 2 >
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