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			您现在的位置在：  首页>>动物 >>生命科学 蛋白质间相互作用研究方法3：BIAcore 快速分析过去已确定的相互作用l      利用BIAcore通过表面胞质基因共振光谱学分析相互作用的蛋白质RAMc通过伯氨基与CM-5传感芯片表面的结合1．将CM-5传感芯片模块嵌入BIAcore仪器。2．全部采用过滤并除气的HEPES缓冲盐溶液。3．将分别含有NHS、EDC、乙醇胺和RAM Fc以及20 mmol/L HCl各100μl的小管置于BIAcore自动进样器架的适当位置。4．将一个空管置于BIAcore自动进样器架上。5．开动仪器，以5μl/min的流速流过一个流动池。6．将75μl的NHS加入到一个空管中。7．在同一个管中再加入75μl的EDC。8．将含有NHS和EDC的小管中的成分混匀。9．注射35μl NHS/EDC混合物使表面活化。10．  注射35μlRAM Fc到活化表面与抗体结合。11．  注射35μl乙醇胺使过量的反应基团失活。12．  快速注射10μl的20 mmol/L HCL，然后用Extraclean除去非共价结合型材料。13．  通过在开始注射RAMc前放置一个基线报道点，并在注射20 mmol/L HCl结束后2 min放置第二个报道点，来测定结合RAMc水平。14．  关闭流动液，关闭命令窗口，保存报道文件。 检测抗-TS < 1 >   < 2 >

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