TNT偶联网织红细胞裂解物系统问题与解答

1)什么是TNT偶联网织红细胞裂解物系统？TNT偶联网织红细胞裂解物系统为研究人员提供了一种可供选择的真核体外翻译系统，一种单管、偶联转录/翻译系统。将转录产物掺入到翻译混合物中，TNT偶联网织红细胞裂解物系统简化了体外翻译的过程，缩短了翻译所需的时间。标准兔网织红细胞裂解物翻译系统所用的RNA来源于用SP6、T3、T7RNA聚合酶启动子在体外合成的转录产物，需要3次分开的反应，每1个反应间需要多个步骤。TNT偶联网织红细胞裂解物系统消除了多步操操作带来的得率低的问题。2)TNT快速偶联转录/翻译系统和TNT偶联网织红细胞裂解物系统有何差别？TNT偶联网织红细胞裂解物系统为研究人员提供了一种单管、偶联转录/翻译系统。TNT快速偶联转录/翻译系统将所有转录和翻译有关的组分，组合在TNT快速超级混合液中，简化了操作步骤，这些组分包括RNA聚合酶、核苷酸、盐、RNasin核酸酶抑制剂，研究人员只需加入模板和甲硫氨酸（一般是放射同位素标记）。相比而言，TNT快速偶联转录/翻译系统更方便（加样步骤少），无残留试剂。另外，镁和钾的浓度可作相应调整，以增加得率和翻译的保真度。3)TNT偶联网织红细胞裂解物能得到多少量的蛋白质？蛋白质的得率和模板有关，在50ul的反应体积中正对照质粒产生150-500ng的蛋白质4)一次反应用多少量的DNA？标准步骤用1ug的DNA。用0.2-2.0 ug
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