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PCR-SSCP法1)提取DNA同前RFLP法 2)PCR扩增同前PCR-RFLP,也可加入1μCi32P-dCTP标记产物。 3)非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳1.取PCR的扩增产物,加凝胶加样液3μl,95℃加热变性2min,冰浴骤冷。同位素掺入的DNA取1μl稀释10倍,加样3μl。2.取样品用微量加样器加入非变性聚丙烯酰胺凝胶样品孔中,200V电泳过夜。 4)放射自显影1.未掺入同位素的PCR产物电泳后,取出凝胶床,撬去粘附的玻璃板,将凝胶浸在固定液中15min。2.用0.2% AgNO3浸泡10min,用去离子水冲洗。3.在显色液中显影,直到获得满意效果。将显色好的凝胶转贴到滤纸上,照相分析结果。 你还没注册?或者没有登录?
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