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（不同的酶情况不同，通常为>100 U/µg）； 低盐浓度（<25 mM） 高pH值（>pH 8.0） 存在有机溶剂（如DMSO、乙醇(9)、乙烯乙二醇、二甲基乙酰胺、二甲基甲酰胺、sulphalane(12)等） 用其他二价离子替代镁离子（如Mn++，Cu++，Co++，Zn++等） 以上因素的影响程度因酶的不同而有所不同。例如EcoR I比 Pst I对甘油浓度更敏感，而后者则对高pH值更敏感一些(2)。抑制星号活性的方法：尽量用较少的酶进行完全消化反应。这样可以避免过度消化以及过高的甘油浓度。 尽量避免有机溶剂（如制备DNA时引入的乙醇）的污染。 将离子浓度提高到100-150 mM（若酶活性不受离子强度影响）。 将反应缓冲液的pH值降到7.0。 二价离子用Mg++。
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