转染

细胞传代(1) 试验准备：200ul/1mlTip头各一盒（以上物品均需高压灭菌），酒精棉球，废液缸，试管架，微量移液器，记号笔，培养皿，离心管。(2) 弃掉培养皿中的培养基，用1ml的PBS溶液洗涤两次。(3) 用Tip头加入1ml Trypsin液，消化1分钟（37。C，5%CO2 )。用手轻拍培养瓶壁，观察到细胞完全从壁上脱落下来为止。(4) 加入1ml的含血清培养基终止反应。(5) 用Tip头多次吹吸，使细胞完全分散开。(6) 将培养液装入离心管中，1000rpm离心5min。(7) 用培养液重悬细胞，细胞计数后选择0.8X106个细胞加入一个35mm培养皿。(8) 将合适体积完全培养液加入离心管中，混匀细胞后轻轻加入培养皿中，使其均匀分布。(9) 将培养皿转入CO2培养箱中培养，第二天转染。细胞转染1）转染试剂的准备A. 将400ul去核酸酶水加入管中，震荡10秒钟，溶解脂状物。B.震荡后将试剂放在－20摄氏度保存，使用前还需震荡，。2）选择合适的混合比例（1：1－1：2/脂质体体积：DNA质量）来转染细胞。在一个转染管中加入合适体积的无血清培养基。加入合适质量的MyoD或者EGFP的DNA，震荡后在加入合适体积的转染试剂，再次震荡。5）将混合液在室温放置10—15分钟。6) 吸去培养板中的培养基，用PBS或者无血清培养基清洗一次。7）加入混合液，将细胞放回
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