目的基因的表达

构建好的重组 DNA 分子进入寄主细胞的过程，称为转化。如果接受异源 DNA 的细胞不是细菌，而是动物细胞或植物细胞，常常称为转染。不是所有细菌细胞或动物细胞都能接受异源 DNA，只有处于感受态的细胞才能接受异源 DNA。感受态细胞通常在细胞表面有一些特异蛋白质，在细胞接受异源 DNA 过程中起作用，称为感受态因子。另外，还有一系列技术方法帮助细胞接受外源 DNA 。这些方法包括：适当加入磷酸钙离子、DEAE- 葡聚糖、显微注射、应用脂质体或电穿孔等。进入寄主细胞的重组 DNA 分子，其中的外源目的基因能否表达，表达效率的高低，仍有很大的差别。不少基因工程工作，因表达效率不够高而裹足不前。实际上，位于目的基因前面的启动子常常是表达效率的关键。所以，要得到目的基因的高效表达，关键首先在于选择合适的载体，尤其是寻找适合目的基因的高表达启动子。用基因工程菌大量发酵生产某种实用的蛋白质产品，在解决高表达之后，还面临着从发酵液中分离纯化蛋白质产品的问题。如果工程菌把所需要的蛋白质分泌于细胞外，则后面的蛋白质分离纯化工作要容易的多。为此，在选择载体，构建重组 DNA 分子时都应有所考虑。如果做不到，工程菌产生的蛋白不能分泌到细胞外，则需要先使菌体破裂，再分离纯化蛋白质，那么难度要大得多。
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