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载体DNA+引入的DNA。把目的基因连接到载体上去，要经过一系列酶促反应，需要几种工具酶，这中间最为重要的是两大类酶：①DNA 限制性内切酶：把载体DN-段切开。②DNA 连接酶：用于连接载体和外源DN-段。此外，在构建 DNA 重组分子中使用的工具酶还有：DNA 聚合酶、逆转录酶、DNA 修饰酶、RNA 修饰酶、核酸外切酶、碱性磷酸酶等。 1、粘性末端的连接：用同一种限制性内切酶或者用能够产生相同粘性末端的两种限制性内切酶分别消化外源DNA分子和载体，所形成的DNA末端彼此互补，用DNA连接酶共价连接起来，形成重组体DNA分子。 图10-3-3 粘性末端的连接 2、平末端的连接：可先生成粘性末端，在带平头末端的DN-段的3’-末端加上多聚核苷酸的尾巴，在载体上加上互补的尾巴，然后用DNA连接酶连接。 图10-3-4 用质粒构建重组DNA分子 用噬菌体DNA构建重组DNA分子
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