生药鉴定常用的DNA分子标记方法

　　DNA 分子标记技术大致可分为三类：一是以电泳技术和分子杂交技术为核心的 RFLP 等技术；二是以电泳技术和 PCR 技术为核心的 RAPD 、 AP-PCR 等 DNA 分子指纹技术和 DNA 测序技术等；三是前两类技术结合的 AFLP 、 RFLP-PCR 、 RAPD-PCR 和基因芯片等。现将主要的 DNA 分子标记技术介绍如下。（一）限制性片段长度多态（ restriction fragment length polymorphism ，简称 RFLP ）　　生物在进化过程中，由于种种原因引起的基因突变和 DNA 分子结构重排，造成了分子内核苷酸排列顺序的改变，在一处或几处发生某种差异，当这种改变（即使是很小的改变）涉及到限制性酶切位点时，酶切后产生的 DNA 片段长度将发生变化，即限制性酶谱的条带方式将出现不同，产生多态性，称为限制性片段长度多态（ restriction fragment length polymorphism ，简称 RFLP ）。一般应用 Southern 杂交检测这种多态性，将琼脂糖凝胶中的 DNA 转移到硝酸纤维素膜（或其它膜）上，然后再用标记的克隆基因作探针进行杂交，经放射自显影后即可在 X 光片上看到 DNA 多态性了。但该方法试验步骤繁琐，包括 Southern 转移、探针标记、杂交、检测等，又受到
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