PCR技术

　聚合酶链式反应 (polymerase chain reaction ， PCR) 是 80 年代中期发展起来的体外核酸扩增技术，是一种模拟自然 DNA 复制过程的体外酶促合成特异性核酸片段技术。它以待扩增的两条 DNA 链为模板，由一对人工合成的寡核苷酸作为介导，通过 DNA 聚合酶促反应，在体外进行特异 DNA 序列扩增。由于在每一循环中合成的引物延伸产物可作为下一循环中的模板，因而每次循环中靶 DNA 的拷贝数几乎呈几何级数增长。　　PCR 技术具有特异、敏感、产率高、快速、简便、重复性好、易自动化等优点；能在一个离心管内将所要研究的目的基因或某一 DNA 片段于数小时内扩增至十万乃至百万倍，在溴化乙锭染色及电泳后，肉眼能直接观察和判断；可从一根毛发、一滴血、甚至一个细胞中扩增出足量的 DNA 供分析研究和检测鉴定。 1. PCR 技术的基本原理　　类似于 DNA 的天然复制过程，其特异性依赖于与靶序列两端互补的寡核苷酸引物。 PCR 由变性 - 退火 - 延伸三个基本反应步骤构成： ① 模板 DNA 的变性模板 DNA 经加热至 93℃ 左右一定时间后，模板 DNA 双链或经 PCR 扩增形成的双链 DNA 解离，使之成为单链，以便它与引物结合，为下轮反应作准备； ② 模板 DNA 与引物的退火 ( 复性 ) 模板 DNA 经加热变性成单链后，温度降至 55
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