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琼脂糖凝胶电泳是分离、纯化、鉴定 DNA 片段的常用方法,具有简便、快速的优点。 DNA 琼脂糖凝胶电泳的原理与蛋白质的电泳原理基本相同, DNA 分子是两性电解质, 在高于其等电点的溶液( pH8.0~pH8.3 ) 中 ,碱基几乎不解离,磷酸基团全部解离, DNA 分子带负电荷,在电场中向正极移动。 DNA 分子在电场中通过介质而泳动,除电荷效应外,凝胶介质还有分子筛效应, 使分子大小和构象不同的 DNA 分子迁移率出现较大差异,从而达到分离目的。 对于线性 DNA 分子,其电场中的迁移率与其分子量的对数值成反比。在凝胶中加入少量溴化乙锭,其分子可插入 DNA 的碱基之间,因此可在紫外光灯下直接观察到 DNA 片段在凝胶上的位置,并可在紫外光灯下或经凝胶成像系统观察或拍照。 你还没注册?或者没有登录?
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