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cDNA产量的很低 A: RNA模板质量低B: 对mRNA浓度估计过高C: 反应体系中存在反转录酶抑制剂或反转录酶量不足D: 反应体积过大 扩增产物在电泳分析时没有条带或条带很浅 A: 最常见的原因在于反应体系是PCR的反应体系而不是RT-PCR的反应体系B: 与反应起始时RNA的总量及纯度有关C: 建议在试验中加入对照RNAD: 第一链的反应产物在进行PCR扩增时，在总的反应体系中的含量不要超过1/10E: 建议用Oligo(dT)或随机引物代替基因特异性引物（GSP）用于第一链合成。由于RNA模板存在二级结构，如环状结果，有可能导致GSP无法与模板退火；或SSⅡ反 转录酶无法从此引物进行有效延伸。目的mRNA中含有强的转录中止位点，可以试用以下方法解决.a. 将第一链的反应温度提高至50℃。b. 使用随机六聚体代替Oligo(dT)进行第一链反应。 产生非特异性条带 A: 用RT阴性对照检测是否被基因组DNA污染。如果RT阴性对照的PCR结果也显示同样条带，则需要用DNase I重新处理样品。B: 在PCR反应中，非特异的起始扩增将导致产生非特异性结果。降低镁离子或是目的DNA的量将减少非特异性结果的产生。C: 由于mRNA剪切方式的不同，根据选择引物的不同将导
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