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RNA抽提纯化是分子生物学研究的基本工作内容。但是由于RNA酶(RNase)的广泛存在和难以灭活的特性,使RNA的抽提纯化和后续工作十分困难。即使Trizol试剂和各类RNA抽提纯化试剂盒的广泛应用使RNA抽提和纯化变得方便快捷,但是涉及RNA的工作仍然是分子生物学研究中最让人棘手的。为了保证您的工作成功,请仔细阅读本操作指南,相信它能帮助您解决常见的问题。总而言之,RNA工作顺利与否的关键是防止RNA酶的污染。RNase无处不在,在实验操作的任何一步,任何偶然的疏忽或不妥当的操作都有可能造成RNase的污染,从而导致整个实验的失败。因此,严格控制实验条件,避免任何可能的污染,是保证实验成功的先决条件。为此,必须作到以下几点: 尽可能在实验室专门辟出RNA操作区,离心机、移液器、试剂等均应专用。RNA操作区应保持清洁,并定期进行除菌。 操作过程中应始终戴一次性橡胶手套,并经常更换,以防止手、臂上的细菌和真菌以及人体自身分泌的RNase带入各种容器内或污染用具。尽量避免使用一次性塑料手套。塑料手套不仅常常给操作带来不便,而且塑料手套的多出部分常常将器具有RNase处传递到RNase-free处,扩大污染。 尽量使用一次性的塑料制品,避免共用器具如滤纸、tips、tubes等,以防交叉污染。例如,从事RNA探针工作的 < 1 > < 2 >
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