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    台朌蓝/胰酶/双抗配制/血清灭活/小滤膜滤器使用

    (1)2%台朌蓝工作液配制称取4g台朌蓝加双蒸水100ml,研磨溶解,离心后取上清。然后,与1.8%氯化钠1:1稀释,配成2%台朌蓝工作液。台朌蓝有效使用浓度为0.2%~4%,用于计数细胞可使用较低浓度。检查细胞活力时,取1滴细胞悬液加1滴2%台朌蓝工作液,3~5分钟后观察。(2)0.25%胰酶-0.02%依地酸二钠(EDTA)配制用GMF-PBS(PH7.2)配制0.25%胰酶-0.02%依地酸二钠(EDTA)(3)双抗配制青霉素:用培养液8ml稀释,备用。链霉素:用培养液10ml稀释,备用。保存:4℃或-20℃保存。(4)血清灭活1、从冰箱中取出血清瓶,放入装有清水的盆中,放入4度冰箱中自然融化;2、融化后尽快把血清瓶放入56℃水浴中,水面超过血清面约1~2cm;3、每5分钟晃动血清瓶,摇匀血清。灭活30分钟后,取出血清,放入冷水浴中复温。冻存于-20℃或分装后冻存。注:血清必需先经灭活补体后才能使用。血清在-20度可保存1~2年。(5)用小滤膜滤器过滤液体除菌1、小滤膜放入去离子双蒸水中,煮至沸腾。取出滤膜,装入小滤器中,扭紧后再松开一圈。高压蒸气灭菌,其后自然干燥。2、使用前先拧紧小滤器,10ml注射器接上小滤器上口,加入2ml待滤液体,推上针芯,并保留数毫升气体。推压针芯,液体滤尽后,继续适当用力推压,针芯有弹性并不能将气体推尽,则表明此滤器滤膜是安装完好的。3、
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