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一、准备100ml玻璃瓶12只,橡皮头12只。反复刷洗、置于鼓风干燥箱干燥、泡酸、自来水冲洗6遍、自来水流水过液、蒸馏水过3遍、置于鼓风干燥箱干燥,包装:纸+2层沙布将瓶口扎紧。包装后高压消毒备用。橡皮头:12只,独立包装。二、配培养液(配制1升粉末培养基为例)1、5%NaHCO3与2N HCl配制:①5%NaHCO3:取5g NaHCO3加双蒸水至100ml,即为5%NaHCO3。②2N HCl:取浓HCl 16.7ml加双蒸水至100ml,即为2N HCl。用于调节培养液pH,pH为7.2-7.4。强酸(HCl)氯离子对细胞生长可能有影响,且贮存时培养基的pH易发生改变。2、其他材料:新鲜制备超纯水(阻抗值>18 MΩ)或三蒸水1000ml(2小时左右);粉末培养基;NaHCO3(Sigma S-4019);电磁搅拌器;无菌血清瓶;0.1或0.2mm无菌过滤膜;pH meter;真空帮浦。滴管2根、1000ml量筒、1000ml烧杯、100ml烧杯、20ml注射器、青链霉素、PH试纸。酒精灯、镊子、试管架、75%酒精棉球、污物杯、抽滤器配套杯一个。滤纸-滤膜-滤纸-滤膜-滤纸3、步骤:①取粉末培养基溶于超纯水中,搅拌使其溶解。②用5%NaHCO3与2N HCl调节pH。培养基以真空帮浦通过过滤膜时,pH会升高0.1-0.2。③以0.22mm无菌过滤膜过 < 1 > < 2 >
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