㈠、概述 整体动物心肌细胞的增殖能力在出生后仅能维持一个短时期,小鼠在出生3周后DNA合成所需的酶的活性及心肌细胞的增殖能力就明显降低至成年鼠水平。小鼠心肌细胞的原代培养,一般选用生后1-10d的乳鼠心脏,尤以出生1-4d的较好,此时心肌细胞已分化充分,适于作各种研究,而出生4d以后的乳鼠心脏中分离出来的心肌细胞较慢发育成为有自律性搏动的心肌细胞。 ㈡、[试剂]1、培养液:1:1 混合的DMEM / F12 培养液,添加终浓度为10%小牛血清(FCS)、100IU/ml 青霉素、100μg/ml 链霉素。2、消化液:胰酶(效价为1:250) 0.08%、胶原酶II(活力为150U/mg) 0.05% ,用pH 7.2-7.8 的D-Hanks溶液配制,-20 ℃保存。3、 D-Hanks溶液(pH 7.2-7.8):KCl 0.4 g , KH2PO4 0.06 g , NaCl 8.00g , NaHCO3 0.35 g , Na 2HPO4•7H2O 0.09 g , 酚红 0.01 g 1L ㈢、[实验步骤] 1、取生后1-4d的乳鼠,用75%乙醇消毒皮肤,再用大头针固定乳鼠的头 < 1 > < 2 >
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