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引言 对DN*段在按特殊要求进行修饰上PCR技术提供了一种比原有技术更快更简单的 方法。因为与重组DNA技术相比，PCR技术本身就较为简单;而且它还可以通过化学合 成寡聚核苷酸引物的方法更为简便地改变DNA的碱基序列，而不需对DN*段进行限制 性内切酶和连接酶操作;再者，PCR技术还可能很方便地进行序列改造，如在引物5端 加上一个“添加”序列(add-on sequences)。此外PCR技术产生的修饰产物效率几乎 可达100%。 Scaharf等人首先提出PCR技术可以很方便地将酶切位点导入DN*段中，这只需 将这些序列加到寡核苷酸引物的5-末端上。虽然这些序列与模板DNA是不朽对的，但 在大多数情况下，它们几乎不影响扩增的特异性和扩增效率;特异性显然是由内引物 的3-末端决定的。当带有这些“添加”引物的DNA链进行在我复制时，这些添加的内 切酶位点序列也就“安装”到由此而扩增出的PCR片段中，目前已有人报道长达45个 碱基的添加序列。 通过PCR引物引入DNA序列变异的原理是非常有用的。最为简便的是它可以使PCR 产物的一条链或另一条链或两条链都特异性地标记上放射同位素、生物素或荧光素。 它还可以在DNA序列的任一位置上进行改变，或用来在任何所需的连接点进行DNA序列 的重组。本章主要就
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