利用萤火虫荧光素酶报告基因检测启动子的转录效率

报告基因和化学发光将基因导入培养细胞或者完整的有机体，对其转染效率的检测是涉及的基础研究的基本前提，并且有可能在医疗方面，如相关的基因治疗，将会有进一步的发展和应用。在过去几年，相继报道了大量的非特异的报告基因，如 b-半乳糖苷酶，b-葡糖苷醛酸酶，萤光素酶以及最近发展出来的b-内酰胺酶和绿色荧光蛋白（GFP）。萤火虫荧光素酶报告检测系统在10年前就已经被引入（1-3），并广泛的应用在生物学和生物医学等研究领域（4-8）。这些研究包括检测体内肿瘤组织的生长情况（9）；检测质粒的拷贝数（10）；重组的杆状病毒的复制（11）；检测巨噬细胞中的抗分枝杆菌试剂（12）；在活细胞或者完整的动物体中，实时检测基因的转录水平（13-15）；突变的DNA的修复（16）；以及具有相似特征的基因体外转染和基因调节的检测（17-19）。荧光素酶报告系统使得在同一细胞或者有机体中能够检测两个或者更多的转录基因成为可能（20）。而对于研究基因在一个细胞群、以及在一定时期内的转录调节，用传统的荧光分光光度计对荧光素酶报告基因进行检测显然受到技术上的制约，目前采用的荧光微孔板技术则能够打破这些制约条件。我们在这里向大家展示的是一篇有关利用荧光素酶报告系统检测启动子的转录效率的应用实例。其中把对建成细胞和初级细胞的转染效率进行了比较。这篇应用实例表明，使用多功能的 Tecan Genios Plus 使
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