微孔板荧光技术研究噬菌作用

前言噬菌功能是免疫系统清除大多数细胞外病理微生物的主要机制。分析此功能对临床诊断包括噬菌细胞缺陷在内的一些病理现象来说是非常重要的。当前用于体外噬菌作用的研究方法都是基于危险的放射性同位素标记被吞噬颗粒来进行的或者是通过费时而又费力的显微镜和微生物学方法进行的。流式细胞术和荧光分光方法用于确定噬菌的速率也曾经得到过报道（ 1－3），而且被证明可以用于简单的动态分析。但是，后述的这些方法都有一些问题。它们要求相当复杂的实验仪器，需要相当数量的细胞才能得到稳定的结果，而且不便于进行动态分析。这是因为这些方法需要在一系列后序步骤中精确测定噬菌细胞所摄取的粒子数量。因此，这些方法极大地不适用于基础噬菌学研究也不易用于临床的常规检测，尤其是需要用最小的血液样品进行测试时更是如此。可能是因为这些不利因素的存在，前述的荧光分析方法并不是特别的成功。在这里，我们描述了一种简单、高重复性而且是精确的噬菌作用研究方法，这种方法可以在96孔板或更高规格的孔板上进行，并采用具有特定大小、形状和天然抗原的、荧光标记的已被热或化学方法杀死的非致病细菌或酵母粒子。另外，也使用了由独立研究者提供的传统的、荧光标记的生物源粒子。实验设置系统描述和试剂 • 用于组织培养的多孔板（ 96孔或其它格式）； • 荧光标记和无荧光标记的标准 BioParticles（M
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