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使用 FATIMA 方法定量分析肿瘤细胞的侵入能力 |
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背景介绍 肿瘤细胞的基本特性之一就是其不受控制而且特有的侵入周边组织的能力。这一特性在在高恶性肿瘤细胞穿过血管组织,并通过血液扩散最终导致肿瘤转移的过程中尤为关键。因此,在体内和体外分析肿瘤细胞的迁移对于理解肿瘤迁移扩散和的分子机理,以及阻止这种扩散的治疗手段方面极为重要。本文所述的方法是定量研究 肿瘤 细胞迁移行为是目前为止在此领域内最方便的体外研究方法,这一系统因为很容易进行操作而无需复杂的设备。近年来,许多的体外定量细胞侵入能力的实验方法得到了报道,这其中包括了细胞侵入胶原胶、纤维蛋白块、人工胞外基质和体外重建基质的系统。在后者中最常用的是从 EHS 鼠肿瘤中分离的膜样胞外基质,商业名称为 Matrigel ( 1 )。 定量研究细胞侵入最好的方法也许是使用显微镜和图像分析技术进行( 2 ),但快速定量检测多个样品则要求使用基于微孔板的技术或类似的系统。使用微孔板分析细胞侵入最初是在实验中使用称之为穿透孔 Transwells 进行的,它里面覆盖了多孔的聚碳酸酯膜从而直接构成了一个 " 侵入 " 的屏障( 3-7 )。 但是,随后出现了一个更为 " 生理 " 的实验方法来评估细胞侵入,使用的是覆盖了单层胞外基质分子或复杂基质类 Matrigel 的多微孔膜,在这些情况下,实际的侵入过程可以看作是真实的主动过程,因为其要求细胞通过 < 1 > < 2 >
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