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    蛋白分离的缓冲液系统比较

      解离/非解离native缓冲液系统 很多应用蛋白质聚丙烯酰胺凝胶区带电泳(zone electrophoresis)的研究使用一种缓冲液系统,该系统的设计把所有的蛋白质分解成单一多肽亚单位。最常用的解离试剂是十二烷基硫酸钠(SDS),一种离子型去污剂,它通过包围在多肽骨架的周围变性蛋白质。在包含有过量的SDS和巯基试剂的蛋白质样品,100℃加热时,二硫键被打开,蛋白质完全解离成它的亚单位。在这些情况下,大部分的多肽以一个恒定的重量比率(1.4g SDS:1g多肽)结合多肽。与去污剂所提供的负电荷相比较,多肽固有的电荷变得微不足到。因而,根据多肽的大小,相同大小的SDS-多肽复合物基本上具有相同的负电荷、形状和凝胶中的迁移率。这种方法简洁而快速,加之只需要微克量蛋白这一事实,使SDS-PAGE成为最广泛使用的,用来确定多肽样品分子量的方法。由于几乎任何来源的蛋白质很容易被SDS溶解,所以这种方法通常都可以适用。 与之相反,用来进行非解离native电泳的非解离native缓冲液系统,则设计用来分离蛋白质混合物,而亚单位之间的相互作用、蛋白质构象和生物学活性
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