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酶联免疫吸附法(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)是免疫酶一种,是一项先进的免疫化学测定技术。因其具有特异性高、敏感性强、结果易于检测,是饲料安全检测中某些违禁药品和添加剂,有害微生物的筛检和毒素的检测,是饲料安全检测中一项新的检测技术。 1 ELISA 的基本原理及方法类型1.1 基本原理 EILSA主要是基于抗原或抗体能吸附至固相载体的表面并保持其免疫活性,抗原或抗体与酶形成的酶结合物仍保持其免疫活性和酶催化活性的基本原理。在测定时,把受检标本(测定其中的抗体或抗原)和酶标抗原或抗体按不同的步骤与固相载体表面的抗原或抗体起反应,用洗涤的方法使固相载体上形成的抗原抗体复合物与其它物质分开,最后结合在固相载体上的酶量与标本中受检物质的量有一定的比例,加入酶反应的底物后,底物被酶催化变为有色产物,产物的量与标本中受检物质的量直接相关,根据颜色反应的深浅进行定性或定量分析。1.2方法类型 ELISA 既可用于测定抗原,也可用于测定抗体。在这种测定方法中有三个必要的试剂和五种常见的检测方法。1.2.l 三个必要的试剂 固相的抗原或抗体;酶标记的抗原或抗体;酶反应的底物。五种常见的检测方法 根据试剂的来源和样品的性状及检测的具体条件,可分为:双抗体夹心法,主要用于检测抗原;间接法,主要用于检测抗体;竞争法,既可用于检测抗原又可用于检测抗 < 1 > < 2 >
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