细菌的芽胞染色

5—20min。（4）涂片：用接种环从试管底部挑数环菌液于洁净的载玻片上，做成涂面，晾干。（5）固定：将涂片通过酒精灯火焰3次。（6）脱色：用水洗直至流出的水中无孔雀绿颜色为止。（7）复染：加蕃红水溶液染色5min后，倾去染色液，不用水洗，直接用吸水纸吸干。（8）镜检：先低倍，再高倍，最后用油镜观察。结果：芽胞呈绿色，芽胞囊和菌体为红色。2.Schaeffer与Fulton氏染色法（1）涂片：按常规方法将待检细菌制成一薄的涂片。（2）晾干固定：待涂片晾干后在酒精灯火焰上通过2—3次。（3）染色：①加染色液：加5%孔雀绿水溶液于涂片处（染料以铺满涂片为度），然后将涂片放在铜板上，用酒精灯火焰加热至染液冒蒸汽时开始计算时间，约维持15-20min。加热过程中要随时添加染色液，切勿让标本干涸。（加热时温度不能太高）。②水洗：待玻片冷却后，用水轻轻地冲洗，直至流出的水中无染色液为止。③复染：用蕃红液染色5min。（4）水洗、晾干或吸干。（5）镜检：先低倍，再高倍，最后在油镜下观察芽胞和菌体的形态。。结果：芽胞呈绿色，菌体为红色。（五）实验作业：绘出所用材料的芽胞和菌体的形态图。（六）注意事项1.供芽胞染色用的菌种应控制菌龄。2.改良法在节约染料、简化操作及提高标本质量等方面都较常规涂片法优越，可优先使用。3.用改良法时，欲得到好的涂片，首先要制备浓稠的菌液，其次是从小试管中取染色的菌液时，应先用接种环充分搅拌，然后再挑取菌液，否则菌体沉于管底，涂片时菌体太少。
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