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    霉菌水浸标本片的制备与观察

    (一)实验目的:学习自制水浸片观察霉菌的形态(二)实验原理:霉菌的营养体是分枝的丝状体。其个体比细菌和放线菌大得多,分为基内菌丝和气生菌丝。气生菌丝中又可分化出繁殖丝。不同霉菌的繁殖菌丝可以形成不同的孢子。霉菌菌丝较粗大,细胞易收缩变形,且孢子容易飞散,所以制标本时常用乳酸石炭酸棉蓝染色液。此染色液制成的霉菌标本片的特点是:细胞不变形,具有杀菌防腐作用,且不易干燥,能保持较长时间,溶液本身呈蓝色,有一定染色效果。利用培养在玻璃纸上的霉菌作为观察材料,可以得到清晰、完整、保持自然状态的霉菌形态;也可以直接挑取生长在平板中的霉菌菌体制水浸片观察。(三)实验器材1.活材料:在马铃薯琼脂平板上或用玻璃纸透析培养法培养3—4天的根霉(Rhizpus sp.)、青霉(Penicillum sp.)、曲霉(Aspergillus sp.);2.染色液和试剂:乳酸石炭酸棉蓝染色液(附录二、(一)、10)、50%酒精(V/V)。3.器材:剪刀、镊子、载玻片、盖玻片、解剖针、显微镜。(四)实验方法1.制水浸制片观察法  在载玻片上滴加一滴乳酸石炭酸棉蓝染色液或蒸馏水,用解剖针从生长有霉菌的平板中挑取少量带有孢子的霉菌菌丝,用50%的乙醇浸润,再用蒸馏水将浸过的菌丝洗一下,然后放入载玻片上的液滴中,仔细地用解剖针将菌丝分散开来。盖上盖玻片(勿使产生气泡,且不要再移动盖玻片)
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