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经由遗传工程技术,透过人为方式,将外源遗传基因殖入或将特定的基因组(去氧核糖核酸,DNA)序列删除或更改的动物,均称基因转殖动物。目前将外源基因转殖至动物染色体,以产制基因转殖动物的方法有数种,包括原核显微注射法、胚干细胞载体法、精子载体法、反转录病毒感染法及体细胞核转置法等。其中以显微注射法应用最广,而体细胞核转置法最具研究发展潜力。 原核基因显微注射法 自从一九八○年代起,以原核基因显微注射法成功产制基因转殖动物以来,经过不断地研究创新,证实此一方法不但有效且具稳定性,故已被广泛应用。 使用原核基因显微注射法的优点甚多,包括外源基因在宿主动物染色体上的整合效率较高,且被转殖的基因可保有其整套的序列。由此产生的基因转殖动物,其所有的组织和细胞中,被嵌入的外源基因仍可正常地经由生殖细胞系传承给子代。 然而,应用显微注射法亦有缺点,例如需具备娴熟灵巧的显微操作经验。以猪胚为例,猪胚因含有许多不透明的脂肪物质,需经远心分离处理,并在显微镜下将胚旋转至适当角度,显露其细胞核后才能注入基因,因此其显微操作速度缓慢。更重要的是外源基因注入胚原核后,系以随机方式嵌入体基因组DNA中,是以原核显微注射法无法掌握基因嵌插情形。 具有纯熟的显微注射与胚移置技术的操作者,进行小鼠的基因显微注射,其外源基因整合成功的机率约为24~31%。 反转录病毒感染法 此法的原理乃是利用反转录病毒具有感染宿 < 1 > < 2 >
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