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    SPA菌协同凝集试验

    基本原理 由于SPA能与IgG的Fc片段非特异性结合,同时不影响Fab片段的活性,所以当带有SPA的金*葡萄球菌与抗体混合,再加入适量的相应抗原,结果会使出现的凝集反应更易于观察。它对颗粒性抗原和可溶性抗原抗体反应都有协同凝集作用。此方法简便、快速、便于推广应用。材料与试剂1.金*葡萄球菌(1) SPA阳性株:NO.1800株(国内分离株)比Cowan株(国际标准株)更为优越,在加热过程中,不易出现自家凝集,更适用于协同凝集实验。(2) SPA阴性株:Wood 46株。2.试用菌种 炭疽杆菌、枯草杆菌及蜡样芽胞杆菌。3.炭疽免疫血清。4.正常免疫血清。5.培养基。6.0.01Mol/L pH 7.4 PBS液,0.1%NaN3的0.01Mol/L pH7.4 PBS液,0.5%福尔马林的0.01Mol/L pH 7.4 PBS液。7.生理盐水。8.磁力搅拌器等。操作方法1.将N0.1800株接种琼脂斜面培养基上,37℃培养20h~24h。2.以少量生理盐水洗下菌体,4 000r/min离心20min。3.将沉淀的菌体用0.01mol/L pH7.4 PBS液洗3次,然后用含0.5%福尔马林的0.01mol/L pH 7.4PBS液制成10%(V/V)悬液,置室温下3h。4.将悬液56℃水浴30min,离心,用PBS液洗2次。最后用含0.1%NaN3的PBS液制成10%悬
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