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悬液，即为SPA菌稳定液，置4℃冰箱备用。5．将SPA悬液1ml(如从冰箱拿出，可再用PBS液洗一次)，加灭活的炭疽阳性血清0.1ml，37℃30min。6．4 000r/min离心20min，去上清，沉淀用PBS液洗2次，最后用含0.1%NaN3的PBS液制成10%悬液，共10ml，此即为SPA菌的凝集用试剂。7．取干净载玻片，用接种环取1滴已标记的SPA凝集用试剂，然后再从琼脂斜面上取少量待试细菌，充分混合，2min内纪录结果。8．对照组的设置(1) SPA阴性菌标记免疫血清对照。(2) SPA阳性菌标记正常血清对照。(3) SPA稳定液与炭疽杆菌凝集对照。(4) 抗炭疽血清与炭疽菌凝集对照。(5) 其它芽胞杆菌凝集试验对照。结果判定强度以“＋~＋＋＋＋”表示：＋＋＋＋： 2min内，菌体凝集成大颗粒，液体透明。＋＋＋ ： 2min内，菌体凝集成较大颗粒，液体透明。＋＋ ： 2min内，菌体凝集成较小颗粒，液体轻度透明。＋ ： 2min菌体部分凝集成细小颗粒,液体混浊。－ ：2min内，无凝集现象，或2min以上才能出现细小颗粒者。
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