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    SPA的纯化
    1．DEAE－Sephadex A－25离子交换层析法⑴ 用0.1mol/L NH4HCO3缓冲液平衡DEAE－Sephadex A－25柱。⑵ 加样后，用0.1mol/L NH4HCO3缓冲液洗脱12h~14h。⑶ 改用0.4mol/L NH4HCO3缓冲液洗脱，流速0.15ml~0.2ml/min，收集流出液，测OD275nm。⑷ 测SPA活性(以对流免疫电泳)，能与人及猪正常血清产生沉淀线的各管合并。⑸ 浓缩或冻干保存。2．Sphadex G100凝胶过柱法装柱、加样，以0.05mol/L pH7.4 PBS洗脱，收集洗脱液，如上法测定活性和蛋白含量。3．亲和层析法(1) 猪IgG的制备：取正常猪血清，硫酸铵提取 球蛋白，再过DEAE－纤维素－32柱，制得纯化的IgG，以0.1mol/L NaHCO3液平衡，配成4mg~5mg/ml溶液。(2) 偶联：将固体溴化氰1.2g溶于20ml蒸馏水中，倾入容积为15ml的Sepharose－4B中，搅拌，同时滴加2mol/L NaOH使pH维持在11.0，反应8min，用500ml预冷的0.1mol/L NaHCO3在2号砂芯漏斗上洗脱已活化的Sepharose－4B(在90Sec内洗脱完毕)，迅速加入IgG液15ml，于4℃缓慢搅拌过夜，次日以PBS充分洗涤，至洗出液OD280nm＜0.02为止。加入30ml 1.0mol/
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