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			您现在的位置在：  首页>>动物 >>生命科学 酶免疫电镜 原理 酶免疫电镜技术是利用酶的高效率的催化作用对其底物的反应形成不同的电子密度，借助于电子显微镜观察，证明酶的存在，从而对抗原进行定位。材料与试剂1．PBS液 取NaCl 8.5g，Na2HPO40.85g，KH2PO40.54g，加水至1 000ml即可。2．DAB溶液 取5mgDAB(3、3二氨基联苯胺)加入10mlTris－HCl缓冲液(0.05mMol/L pH 7.6)，加1%H2O20.5ml～1ml。配制时，避光进行，现用现配。在显色完成冲洗过程中，要保持流水冲洗，防止非特异性物质积于标本上。3．戊二醛固定液 取50ml 0.2Mol/L PBS缓冲液与25%戊二醛按以下比例配制：0.2Mol/LPBS液 50 50 50 50 50 25%戊二醛（ml） 4 6 8 10 12重蒸馏水（ml） 46 44 42 40 28固定液终浓度（%） 1.0 1.5 2.0 2.5 3.0操作方法1．酶标抗体的制备2．取材 将培养细胞或悬浮细胞用0.1Mol/L PBS液冲洗，离心沉淀后，立即转入固定液(2%甲醛液或2%戊二醛液均可)pH 7.2，4℃固定5min～30min(依抗原性质所定)。如病料为组织块，则取适当大小，先固定1h然后取出，以新的双面刀片切成50～100µm的薄组织再行固定1h～2h。3．漂洗 以PBS液漂洗过夜，换液3～4次。4．血清 < 1 >   < 2 >

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