E玫瑰花环试验

基本原理玫瑰花环试验是体外检测人和动物细胞免疫功能的一种方法。E—玫瑰花环试验是T淋巴细胞计数的一种重要方法。由于人和动物的T淋巴细胞表面有红细胞受体，因此红细胞可以粘附到T淋巴细胞的周围而形成玫瑰花样的细胞团。在红细胞中，以绵羊红细胞最为常用。B淋巴细胞则没有红细胞受体，所以不能形成E—玫瑰花环，以资鉴别。材料与试剂1．肝素抗凝剂2．淋巴细胞分层液配制方法见细胞分离技术。3．无Ca2 、Mg2 Hank’s液NaCl 4.00gNaHCO3 0.175gKCl 0.20gNa2HPO4.12H2O 0.076gKH2PO4 0.030g葡萄糖 0.50gH2O加至 500.00ml用5.6％NaHCO3调pH至7.2，115℃15min灭菌。4℃贮藏备用。4．5.6％NaHCO3液NaHCO3 5.60gH2O 100.00ml115℃20min灭菌, 4℃贮藏备用。5．0.8％戊二醛溶液25％戊二醛溶液 0.32mlHank’s液 9.68ml用前配制。6．Giemsa—weight染色液Giemsa粉 0.03gWeight粉 0.30g甲醇 100.00ml先将染料一起放入研钵内，加入少量甲醇，研磨细，然后倒入瓶内，并用甲醇冲洗研钵内染料，一起倒入玻瓶内，补足甲醇量，备用。操作方法1．取肝素抗凝血2ml
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