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原理 B淋巴细胞表面具有补体C3受体,红细胞可与相应的抗体(溶血素)结合形成抗原抗体复合物(EA),以红细胞作为指示细胞,通过补体传统途径活化补体,而产生活化的C3,然后与活化的C3结合形成花环,以供计数B淋巴细胞。材料与试剂1.鸡红细胞悬液的制备 由于绵羊红细胞易与T淋巴细胞形成E—玫瑰花环,易造成混淆,所以一般在检测B淋巴细胞时,采用鸡红细胞。从鸡翼下静脉采血,用肝素抗凝,以Hank’s洗涤2次备用。2.抗鸡红细胞抗体的制备 选2kg~3kg的健康家兔,以Hank’s液洗过的压积红细胞进行免疫,每日背部皮*射1次,共注5次,注射量为0.5 ml、1.0 ml、1.5 ml、2.0 ml、2.5ml。第六次改用静脉注射50%压积红细胞悬液1ml,一日一次,连注3天。末次注射后7天试血,测定红细胞的凝集效价,以出现“ ”的最高抗血清稀释度判定为血凝效价。效价达1:2 000以上者为合格。应用时采用凝集价的1/2(亚凝集价)作为抗血清的稀释度(即1:4 000)。溶血素的效价测定 试验组 对照组 < 1 > < 2 >
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