|
|
|
|
|
|
|
|
原理 混合单个核细胞悬液在通过尼龙毛柱时，B细胞、浆细胞、单核细胞和一些辅助细胞被选择性粘附于尼龙毛上，而多数T细胞则通过尼龙毛柱，这是获得富含T细胞群的有效方法。材料及试剂1．尼龙毛（Femwall Laboratories,LP－1 Leukoqak leukocyte Filters）。2．烧杯、铝箔、漏斗、一次性手套等。3．装填尼龙毛柱，一次性注射器。4．取自然沉降的上层血浆，过聚蔗糖—泛影葡胺分层液后，获取的血浆和分层液之间的单个核细胞层。操作方法1．尼龙毛的清洗与干燥（1）戴上已经洗去滑石粉的一次性手套，将尼龙毛（1包或2包，每包35g）放入烧杯中，加入蒸馏水或去离子水，用铝箔盖上烧杯并煮沸约10min。（2）冷却至常温，倒入漏斗内，使水滴干。（3）重复（1）、（2）步骤6次。（4）将尼龙毛摊在铺有纱布的方盘内，37℃温箱干燥2～3天后，贮藏在带盖的方盘内。2．装尼龙毛柱（1）取50ml玻璃注射器，拔去注射芯，在注射器头上套一段带夹子的胶管。（2）将尼龙毛梳理，并适当折叠，以适应注射器的直径，填入注射器内，约20ml的体积。（3）将填好尼龙毛的注射器连同注射器芯一起包好，高压灭菌。3．细胞分离（1）将注射器固定在支架上，倒入37℃的细胞培养液，关闭阀门一定时间，然后打开阀门，放掉细胞培养液，以清洗几次尼龙毛，关上阀门。（2）将要分离的细胞液用预先加温
< 1 > < 2 >
|
|
|
|
|
设为首页 | 加入收藏 | 广告服务 | 友情链接 | 版权申明
Copyriht 2007 - 2008 © 科普之友 All right reserved |
